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液相色谱分析中等度和梯度的区别?

更新时间:2024-11-05

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在液相色谱分析洗脱,分为等度洗脱和梯度洗脱

等度:流动相组成不变通常适用于单一组分或简单组分混合物的分离,如药物主成分含量测定;

梯度:流动相比例随时间变化通常适用于复杂组分混合物的分离,如药物杂质分析。

等度和梯度的优缺点?

等度洗脱:

优点:流速不发生变化,压力稳定,实验结果准确、可靠。

缺点:多组分检测或有杂质干扰情况下分离度可能会差,而且不容易优化,对于某些复杂样品分析时间长,峰形差


梯度洗脱

优点:

a. 多组分检测或有杂质干扰情况下提高分离能力

b. 缩短某些复杂样品的分析时间

c. 改善峰形,减少拖尾

d. 提高柱效,增加检测灵敏度

缺点:

a. 梯度洗脱方法运行后都需要重新平衡液相色谱柱,耗时较长

b. 由于不同的液相色谱仪存在不同的体积滞后,所以梯度洗脱方法在不同仪器间转移时可能会出现分离结果的差异

c. 流速变化得由程序控制,有时会出错

d. 压力可能会不稳定

e. 混合时可能会产生气泡,影响基线噪声及漂移

f. 高压混合时可能会产生热量

g. 对混合器要求很高,如果混合不好,基线噪声和漂移会很大

h. 由于流动相比例发生变化,基线可能会漂移

i. 实验准确度、稳定性没有等度高

j. 故障率高于等度