液体自动进样器是高效液相色谱分析的核心自动化部件,其工作流程包括取样、清洗和注入三个关键步骤,每个步骤的规范操作直接关系到分析结果的准确性和重现性。
取样是液体自动进样器的第一步,也是保证进样量准确性的基础。取样前需进行样品盘定位,进样针在Z轴方向下降至样品瓶液面以下2-3mm处,避免针尖接触瓶底。取样时进样针以恒定速度抽取样品,抽取体积通常为设定进样量的2-3倍,其中部分样品用于润洗针管和定量环,剩余样品排出至废液。取样速度应根据样品粘度和进样量设定,高粘度样品应降低取样速度,避免产生气泡。取样过程中需注意观察样品液面高度,确保针尖始终浸没在液面以下。对于微量样品,可采用部分装样模式,减少样品消耗。取样完成后,进样针在Z轴方向提升至安全高度,避免与样品瓶碰撞。
清洗是防止交叉污染的关键环节。液体自动进样器通常配备多路清洗系统,包括针外壁清洗和针内壁清洗。针外壁清洗通过清洗槽或清洗口进行,进样针下降至清洗位置,清洗溶剂从四周喷出,冲洗针外壁附着的样品残留。针内壁清洗通过抽吸和排出方式完成,进样针抽取清洗溶剂,在废液口排出,反复多次直至针内壁清洁。清洗溶剂的选择应根据样品性质确定,通常采用与流动相相同或相似的溶剂,避免溶剂不互溶导致沉淀堵塞。清洗程序包括强洗和弱洗两个阶段,强洗使用强溶剂去除顽固残留,弱洗使用弱溶剂平衡系统。清洗体积和时间需根据样品残留程度设定,一般建议清洗体积为针体积的5-10倍,清洗时间不少于30秒。对于高浓度样品或复杂基质样品,应增加清洗次数和清洗体积。

注入是液体自动进样器的核心步骤,直接决定进样量的准确性。注入前需进行定量环填充,进样针将样品推入定量环,多余样品排出至废液。定量环填充完成后,进样阀切换至进样位置,流动相将定量环中的样品带入色谱柱。注入过程中需注意阀切换时机和切换速度,避免产生压力波动和峰形畸变。进样针在注入过程中应保持与进样口的良好密封,防止样品泄漏。注入完成后,进样阀切换回装载位置,准备下一次进样。对于微量进样,可采用部分装样模式,通过控制进样针推入体积实现微升级进样。注入过程需严格控制温度,避免温度波动导致进样体积变化。
液体自动进样器的工作流程需根据样品性质和仪器配置进行优化。建立标准操作程序,包括取样参数、清洗程序、注入条件等,确保分析结果的重现性和准确性。通过规范的工作流程,液体自动进样器可实现高通量、高精度的自动化分析,大幅提高实验室工作效率。